6.4 B: Culture pure

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Objectifs d’apprentissage

  • Décrivez comment les cultures microbiennes pures peuvent être cultivées dans un milieu de croissance à base de gélose

Les cultures microbiennes sont des méthodes de diagnostic fondamentales et de base largement utilisées comme outil de recherche en biologie moléculaire. Il est souvent essentiel d’isoler une culture pure de micro-organismes. Une culture pure (ou axénique) est une population de cellules ou d’organismes multicellulaires qui croissent en l’absence d’autres espèces ou types., Une culture pure peut provenir d’une seule cellule ou d’un seul organisme, auquel cas les cellules sont des clones génétiques les unes des autres. Dans le but de gélifier la culture microbienne, le milieu de gel d’agarose (agar) est utilisé. La gélose est une substance gélatineuse dérivée des algues. Un substitut bon marché pour la gélose est la gomme de guar, qui peut être utilisée pour l’isolement et l’entretien des thermophiles.

Figure: Milieu sélectif: Geomyces destructans en culture à partir de tissus de chauves-souris., (A) Tubes de culture originaux de gélose Sabouraud additionnée de neuf antibiotiques et incubée à 4°C pendant six ou huit semaines; remarquez la croissance abondante des souches de G. destructans. B) Une certaine contamination fongique sur des isolats individuels était visible comme le montre le gros plan d’un tube de culture. C) Enrichissement et récupération de colonies fongiques pures en traitant une culture contaminée par des bactéries avec de l’acide chlorhydrique.

Les cultures microbiologiques peuvent être cultivées dans des boîtes de pétri de tailles différentes qui ont une fine couche de milieu de croissance à base de gélose., Une fois que le milieu de croissance dans la boîte de pétri est inoculé avec les bactéries désirées, les plaques sont incubées à la meilleure température pour la croissance des bactéries sélectionnées (par exemple, généralement à 37 degrés Celsius pour les cultures d’humains ou d’animaux ou plus bas pour les cultures environnementales). Une autre méthode de culture bactérienne est la culture liquide, dans laquelle les bactéries désirées sont suspendues dans un bouillon liquide, un milieu nutritif. Ceux-ci sont idéaux pour la préparation d’un dosage antimicrobien., L’expérimentateur inoculerait le bouillon liquide avec des bactéries et le laisserait pousser pendant la nuit (ils peuvent utiliser un shaker pour une croissance uniforme). Puis ils prendre des aliquotes de l’échantillon pour tester l’activité antimicrobienne d’un médicament spécifique ou de protéines (peptides antimicrobiens). Comme alternative, le microbiologiste peut décider d’utiliser des cultures liquides. Ces cultures ne sont pas secouées et elles fournissent aux microbes un gradient d’oxygène.

Points clés

  • Une culture pure peut provenir d’une seule cellule ou d’un seul organisme, auquel cas les cellules sont des clones génétiques les unes des autres.,
  • Les cultures microbiennes sont des méthodes de diagnostic fondamentales et de base largement utilisées comme outil de recherche en biologie moléculaire.
  • La forme la plus courante de cultures microbiennes est liquide ou solide ( gélose ).

Termes clés

  • gélose: Matériau gélatineux obtenu à partir des algues marines, utilisé comme milieu de culture bactérienne, en électrophorèse et comme additif alimentaire.

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