Epilálás serkenti a haj, a bőr hiperpigmentáció a C57BL/6J egerek
Általában a hajhagymákat a háti bőr egerek kijelző egy szinkronizált első haj cycle15., A szőrtüszők a teljes háti bőrön általában anagénben vannak a születés utáni 1-12. naptól kezdve, katagénben a 16-19.naptól, telogénben pedig a következő anagen11, 22, 23-ig. A bőr pigmentációs változásainak megjelenítéséhez a szülés utáni hajciklus során a c57bl/6J egerek hátsó törzsét és fejrészeit a születés utáni 11.napon (P11) (anagen vi szakasz az első hajciklusban), P21 (telogén szakasz) vagy P30. Amint az ábrán látható. 1A, az egész bőr homogenikusan fekete volt a P11-nél, homogén rózsaszín pedig a P21-nél., Érdekes módon azonban a P30-nál a fejbőr bőre még mindig rózsaszín volt, míg a hátsó bőr fekete volt (ábra. 1A). Ezek az adatok azt mutatják, hogy bár McSCs a haj folliculusok differenciálódnak érett melanociták során az első haj ciklus, ők nem aktív regenerálódni melanociták egy időben pont, amikor vissza hajhagymák már az anagén, a második haj ciklus. Ezért megvizsgáltuk, hogy az epilálás ebben az időpontban aktiválhatja-e a fejbőrben lévő Mcsc-ket., Ez epilálás kezelés jelentősen kiváltotta expressziója gyulladásos tényezők, de a szint sokkal alacsonyabb, mint által kiváltott seb sérülés, ami arra utal, hogy az epilálás indukálja csak enyhe formája a bőrsérülés (ábra. S1). Érdekes módon, amikor a fejbőr szőrszálak a C57BL/6J egerek voltak epilated a P21 (mint említettük, a telogén szakaszban az első haj ciklus), fejbőr pigmentáció szignifikánsan nőtt (6.06 ± 1,5-szer, n = 9) már 7 nappal később, P28 (Fig. S2A, B) és az epilálási terület pigmentált szigetet hozott létre (Fig. 1B)., Ennek megfelelően az epilálás által kiváltott regeneráló szőrszálak hiperpigmentáltak (2, 68 ± 0, 87-szeres, n = 5), összehasonlítva a nem epilált kontrollok szőrszálaival (ábra. 1C, D). Ezek az eredmények azt mutatják, hogy a fejbőrön az epilálás idő előtti bőr repigmentációt és haj hyperpigmentációt okozhat.
epilálás által kiváltott bőr-és haj hyperpigmentáció c57bl/6 egerekben., (A) a kontroll egerek képei a fent említett korokban (felső panelek) és közvetlenül az (alsó panelek) hajvágás után, hogy felfedjék a bőr pigmentációját. Ne feledje, hogy az első szülés utáni hajciklus során a fejbőr és a hátbőr színei különböznek egymástól. A nyilak a fejbőr bőrének különböző színére mutatnak a P11 és P30 értéken. B) a P21-nél epilált egerek fejbőrét, amelyet a P28-nál figyeltek meg a fehér pontozott vonal mentén (alsó panelek) történő levágás előtt vagy után. A nyilak a levágott terület bőrszínére mutatnak. C) a fejbőr pigmentációja a P21-es epilálás után. Megjegyzés hyperpigmentation 14 nappal az epilálás után., A nyilak a fiziológiai szőrszálak és az epilálás által kiváltott regenerált szőrszálak eltérő színét jelzik. D) P35 a P21-en epilált kontroll egerek és egerek szőrszál-és melaninszintje. E) egy 1,5 éves egér hátsó szőrszálai az epilálás előtt és után. A nyilak jelzik a hajszín változását az epilálás előtt és után. F) az epilálás után 30 nappal egy 1,5 éves egér epilált területéről és környékéről származó hátsó hajszálak (felső panel) és melaninszintek (Alsó panel). A nyilak a fiziológiai szőrszálak és az epilálás által kiváltott regenerált szőrszálak eltérő színét jelzik., *P < 0.05, * * p < 0.01.
mivel a szőrszálak fiziológiailag regenerálódnak a c57bl / 6J egerek hátán az első szülés utáni hajciklus során (1.ábra). 1A), arra is kíváncsiak voltunk, hogy az epilálás megváltoztatja-e a haj regenerálódását a hátán. Valójában, 7 nappal a P21-es epilálás után az epilált terület hiperpigmentált volt, mint a nem szűrt (ábra). S2C, D), csakúgy, mint az egyes regenerált szőrszálak (ábra. S2E)., Ezek az adatok arra utalnak, hogy az epilálás által kiváltott hiperpigmentáció nem korlátozódik a fejbőrre. Tekintettel ezekre a megfigyelésekre, azt is megkérdeztük, hogy az epilálás által kiváltott hiperpigmentáció hatásai továbbra is működnek-e a régi egerekben. Meglepő, hogy a regeneráló szőr a hátán 1,5 éves egerek vált, jelentősen hyperpigmented 30 nappal azután, hogy epilálás (1.07 ± 0.08 szeres, n = 3), összehasonlítva a unepilated, pihen a szőrszálakat (0.84 ± 0.03) (Fig. 1E, F). Ezenkívül a HPLC elemzés kimutatta, hogy az epilálás eumelanin szintézist (1, 79 ± 0, 09-szeres, n = 3) indukál a pheomelanin szintézis helyett (0, 97 ± 0.,12-szeres, n = 3) a hátsó szőrszálakban (ábra. S3). Ez arra utal, hogy az epilálás indukálja az MSCS aktiválását, hogy érettebb melanocitákat generáljon, vagy növeli a melanin szintézisét Érett melanocitákban az idős egerek hajhagymáiban.
epilálás-a sérülés stimulálja az McSC proliferációját és bőr-és epidermális melanociták képződését indukálja, valamint a melanogenezissel összefüggő gének expresszióját
tekintettel arra, hogy a melanogenezist anagen24-hez kötik, megvizsgáltuk, hogy az epilálás által kiváltott pigmentációt a fejbőrben anagén indukció okozza-e. Amint az ábrán látható., 2A, az epilálás által kiváltott szőrtüszők azonnal elkezdték az anagént, míg a nem epilált kontroll egerekben a szőrtüszők hosszabb ideig telogénben maradtak. Ezért a nyugalmi szőrtüsző MCS reagált epilálás azáltal, hogy aktiválódik. Hét nappal az epilálás után pigmentált melanocitákat figyeltek meg nemcsak az érett hajhagymákban, hanem a dermisben, a szőrtüszők nyílásaiban, valamint az interfollikuláris epidermiszben is (ábra. 2A)., Ennek megfelelően a melanocita-specifikus markereket, például a PMEL17-et és a TYR-t kimutatták az epilálás által kiváltott pigmentált régiókban, de nem a kontroll szőrtüszőkben (ábra). S4A). Ezen kívül, a western blot adatok azt mutatták, hogy a szint a melanogenesis kapcsolódó fehérjék TYRP1 (4.22 ± 0.96 szeres, n = 6), valamint a TYR (9.75 ± 2.76 szeres, n = 6) mindketten jelentősen nőtt által epilálás (Fig. S4B és S9). Az eredmények azt sugallják, hogy az epilálás nemcsak aktiválja az MCC-ket, hanem a melanociták regenerálódását is indukálja az interfollikuláris területek feltöltésére.,
az epilálás serkenti az McSC proliferációját, az epidermális melanociták regenerálódásához vezet, és a melanogenezissel összefüggő gének expresszióját indukálja. (A) H&E a fejbőr hajának különböző szakaszainak festése 1, 4 és 7 nappal az epilálás után. A C57BL/6 egereket P21-en epilálták, és a szőrtüszők szövettanát a megadott napokon elemezték., B,C) anti-MITF immunstaining (B) és H&a P28 kontroll egerekből származó hátsó szőrtüszők és a P21-en epilált korcsoportba tartozó egerek festése (C). A nyilak jelzik a MITF + sejteket (B) és a melanin granulátumot a hajhagymában (C). Az anti-MITF immunfestés 3D képeit az ábra mutatja. S10. D) anti-KIT és Ki67 Immunszuppressziója c57bl/6J egerek szőrtüszőiben 3 nappal az epilálás után. Ne feledje, hogy az epilálás az Mcsc-K proliferációját idézi elő. Nyilak jelzik a készlet + sejtek a haj dudor., E) a p24-es kontroll egerekből és a P21-es (felső panelek) és H&e a hátbőr (alsó panelek) festése a 7.napon az epilálás után. Megjegyzés KIT-pozitív sejtek az epidermiszben 3 nappal az epilálás után, pigmentált melanociták az epidermiszben 7 nappal az epilálás után. A nyilak jelzik a KIT + cellát (felső panelek) és a pigmentált cellát (alsó panelek). (F) A grafikonok A Kit+ (bal oldali panel) és a pigmentált sejtek (jobb oldali panel) számát mutatják az epidermiszben 3 nappal, illetve 7 nappal az epilálás után., DP, dermális papilla; Epi, epidermisz; Der, dermis; M, melanocyta; MG, melanin granulátum; SG, faggyúmirigy; sHG, másodlagos hajcsíra. Bar, 50 µm. *P < 0.05, * * p < 0.01.
a vissza a bőr, 7 nap után epilálás a P21, a teljes melanocita száma az egyes haj izzó, (20 ± 1.9) szignifikánsan növekedett képest élettani regeneráció (15.7 ± 1.4) (Fig. 2B)., Ennek megfelelően több melanoszóma is volt az epilálás által kiváltott regenerált hajhagymákban, mint a fiziológiailag regenerált hajhagymákban (ábra. 2C és Fig. S4C, D). Ezek az adatok arra utalnak, hogy az epilálás mcsc hiperproliferációt váltott ki az első szülés utáni hajciklus során. Valójában 3 nappal az epilálás után az MSCS proliferációs aránya magasabb volt (a sejtek 86,2 ± 3,5%-a ki67-pozitív volt az epilálás után, szemben a kontrollokban a Ki67-re pozitív sejtek 45,6 ± 3,4% – ával) (ábra. 2D)., Érdekes, hogy a KIT-pozitív sejteket nem találták meg az epidermiszben, de az epilálás után 1 nappal a hajbuborékban léteztek, egyértelműen az epidermiszben 3 nappal az epilálás után (1.ábra). 2E és Fig. S5). A Kit + sejtek száma az epilált epidermiszben (2,32 ± 0,72/szakasz, n = 4) jelentősen megnő a fiziológiai epidermiszhez képest (0,77 ± 0,68 / szakasz, n = 4) (ábra. 2F). Ennek megfelelően 7 nappal az epilálás után pigmentált sejteket is találtak az epidermiszben (ábra. 2E, F)., Továbbá, kvantitatív RT-PCR 7 nap után epilálás kiderült, indukciós sok melanogenesis kapcsolatos gének, beleértve a Tyr (2.84 ± 1.13 szor több, mint a kontroll, n = 3), Tyrp1 (3.89 ± 0.72 szeres, n = 3), Mitf (3.47 ± 0.38 szeres, n = 3), Sox10 (2.13 ± 1.13-szeres, n = 3), Pax3 (3.18 ± 0.43 szeres, n = 3), valamint Ednrb (3.28 ± 0.62 szeres, n = 3) (Fig. S6A). Ezek az eredmények együttesen azt sugallják, hogy az epilálás az MSCS proliferációját, az epidermiszbe való migrációt, valamint a melanogenezis program stimulálását indukálja.,
Epilálás indukálja EDN3 kifejezés a hajhagymákat, valamint a felhám
Között a gének által kiváltott epilálás, EDNRB volt különösen érdekes, mert a jól ismert részvétel a rendelet a melanocita lineage1, 12. Az utóbbi időben az edn1 és Edn2 ligandumainak expresszióját a fiziológiás haj anagén hatására fokozták, de ligandumának edn3 expresszióját nem befolyásolták12. Ezért azon tűnődtünk, vajon a hátsó szőrszálak epilálása kiváltja-e ezeket a ligandumokat., A fenti eredmények megerősítésekor azt találtuk, hogy a fiziológiai regeneráció során az Edn1 és Edn2 expressziója a hátsó bőrben a P26-nál nőtt, de az Edn3 expresszió nem mutatott változást (ábra. 3a és Fig. S11). Meglepő módon azonban az epilálás nemcsak az Edn1 és Edn2 expresszióját váltotta ki, hanem az Edn3 expresszióját is (ábra. 3A), amelynek kódolt terméke, az EDN3, korábban kimutatták, hogy részt vesz a melanocita fejlődésben1, 25, 26. Ezért tanulmányunkat az EDN3-ra és annak jelátviteli útvonalára összpontosítottuk. Megállapítottuk, hogy az edn3 fehérje szintje jelentősen megnőtt az epilált bőrben (D0, 0.,94 ± 0.2-szeres; D3, 1.81 ± 0.09 szeres; D5, 4.57 ± 0.67 szeres; n = 6), de továbbra is alacsony a kontroll bőr (D0, 1.25 ± 0.47 szeres; D3, 0.83 ± 0.14 szeres; D5, 1.21 ± 0.2-szeres; n = 6) (Fig. 3b és Fig. S12). Az immunhisztokémia azt mutatta, hogy az 1.napon az epilálás során az EDN3 fehérje nőtt a dermális papillában, az epidermiszben, valamint a másodlagos hajcsírában. A 7. napon a szőrtüszők nyílásaiban is nőtt (ábra. 3C). A magas epilálás által kiváltott EDN3-szinttel rendelkező régiók szoros kapcsolatban álltak a másodlagos hajcsíra (sHG) vagy a hajhagyma melanocitáival., Felnőtt heterozigóta ednrb lacZ / + egerek alkalmazásával azt találtuk, hogy az EDNRB a hajhagymák pigmentált melanocitáiban és az sHG-ben fejeződik ki, hasonlóan a Dct-lacZ kifejeződéséhez a szőrtüszőkben (ábra. 3D). Ezenkívül az immunfestési adatok azt mutatták, hogy a β-Gal pozitív sejteket KIT-pozitív sejtekkel társították az sHG-ben, valamint a mitf-pozitív sejtekkel a hajhagymában (ábra). 3E), ami arra utal, hogy az EDNRB-t MSCS-ben és melanocitákban fejezik ki., As expected, 7 days after epilation, western blot analysis and immunostaining data showed that Ednrb-lacZ expression is significantly increased in melanocytes (Figs S6B,C and S13). These results suggest that epilation induces EDN3, which then stimulates its receptor EDNRB to regulate McSCs and melanocytes.
Epilation induces expression of endothelin-3 (Edn3) in C57BL/6 J mice. (A) RT-PCR and qRT-PCR analysis for Edns expression changes in skin after epilation., Az egereket P21-en epilálták, a génexpressziót pedig a megadott napokon elemezték. A teljes hosszúságú géleket az ábra mutatja. S11. B) Western blotting analysis for protein expression of EDN3 in the skin. A teljes hosszúságú géleket az ábra mutatja. S12. C) az edn3 Immunfluoreszcenciája a fejbőr bőrén 0, 1, 4 és 7 nappal az epilálás után. A nyilak jelzik az edn3 + sejteket a szőrtüszőkben. D) DCT-lacZ transzgenikus egerekből (felső panelek) és ednrb lacZ/+ egerekből (alsó panelek) származó szőrtüszők x-gal festése. Nyilak jelzik a lacZ + sejtek a haj kidudorodik, izzók., E) β-Gal, KIT és MITF Immunhisztokémiája pigmentált szőrtüszőkben a születés utáni 7. naptól kezdve ednrb lacZ/ + egerek. Nyilak jelzik KIT és β-Gal együtt jelölt sejtek a dudor (felső panelek) és MITF és β-Gal együtt jelölt sejtek a hajhagyma (alsó panelek). Epi, epidermisz; DP, dermális papilla; sHG, másodlagos hajcsíra. Bar: 50 µm. ** Jelzi p < 0.01.
EDN3 jól ismert a melanocita prekurzorok növekedésének és differenciálódásának serkentésére gyakorolt hatásairól.1, 25, 26., Az utóbbi időben az EDN3 transzgenikus túlexpressziójáról számoltak be, hogy megakadályozzák a többszöri epiláció által okozott hajszürkülést27, ami arra utal, hogy az EDN3 az Mcsc-ket is érinti. Az EDN3 McSCs-re gyakorolt hatásának vizsgálatához izoláltuk a DCT + sejteket az E16. 5 wildtype epidermiszből, és STIMULÁLTUK őket EDN3 vagy BQ788 (EDNRB inhibitor) segítségével. Amint az ábrán látható. S7A, stimuláció EDN3 jelentősen növeli a proliferáció mértéke a DCT+ sejtek (a 43.7 ± 2% – ig 61.4 ± 7,5% – os, n = 5), de ez a hatás a EDN3 teljesen blokkolja BQ788 (26.4 ± 1.56%, n = 5)., Azon tények alapján, hogy a nem pigmentált sejtek esetében a DCT az Mcsc-K specifikus markere, és hogy az E16.5 epidermisben nincsenek Érett melanociták4, 28, Az eredmény azt sugallja, hogy az Edn3/EDNRB szükséges az McSC proliferációjához.
ednrb szükséges epilálás által kiváltott haj és bőr pigmentáció
, hogy értékelje a fontosságát EDNRB jelzés epilálás által kiváltott bőr hyperpigmentation, használtunk homozigóta Ednrb lacZ/ lacZ (Ednrb−/−) egerek. Az ilyen egerek nagyrészt pigmentsejtektől mentesek, de a fej és a farok tövénél pigmentált foltokat tartanak., Tizennégy nappal az epilálás után a fej régióban a regeneráló szőrszálakat hiperpigmentálták wildtype egerekben (2, 41 ± 0, 55-szeres, n = 5), de nem Ednrb – / – egerekben (ábra. 4A, B). A unepilated Ednrb−/− egerek, a melanin szinten a hajszálakat alacsonyabb volt (0.51 ± 0.06 szeres, n = 5), mint azok az ellenőrző wildtype egerek (1.02 ± 0.14 szeres, n = 5) (Fig. 4B). Ezenkívül a wildtype egerekben jelentősen megnőtt a bőr repigmentációja, de csak kissé Ednrb – / – egerekben (ábra. 4C). Az epilálás által kiváltott bőr melanin szintje szignifikánsan alacsonyabb volt az Ednrb – / – egerekben (1, 85 ± 0.,79-szeres, n = 9) a wildtype egerekhez képest (5,1 ± 0,62-szeres, n = 9). Ezek az eredmények arra utalnak, hogy az Ednrb törlése megzavarja az epilálás által kiváltott haj hyperpigmentációt és a bőr repigmentációját. Ezenkívül az EDNRB elvesztése a hajszüreteléshez kapcsolódik. A melanin szint pigmentált szőr tengelyek Ednrb−/− egerek csökkentették között egy hónapos korban (0.96 ± 0.1-szeres, n = 4), illetve 12 hónapos korban (0.37 ± 0.12-szeres, n = 4), a kontraszt, hogy a szint a hajszálakat a wildtype egerek (1.96 ± 0.17 szeres, n = 4 egy hónapban; 2.15 ± 0.43 szeres, n = 4, 12 hónap) (Fig. S7B).,
az ednrb genetikai és farmakológiai zavarai gátolják az epilálás által kiváltott haj-és bőr hyperpigmentációt. A) az Ednrb – / – egerek haj pigmentációja a P21-es epilálás előtt és után. A nyilak az Ednrb−/− fejbőr epilált (jobb oldali panelek) és nem filált (bal oldali panelek) pigmentált szőrszálaira mutatnak. B) a wildtype és az ednrb−/− egerek szőrzetének szövettani szakasza (felső panelek) és melanintartalma (Alsó panel) az epilálás előtt és után., A nyilak jelzik a melanin csökkenését az ednrb – / – egerek hajszálában. C) P28 wildtype és ednrb−/− egerek fejbőrének pigmentációja a P21-es epilálás után. A nyilak a wildtype (felső panelek) és az Ednrb−/− egerek (alsó panelek) epilált területére mutatnak. D, E) a P21-en epilált P26 egerek Hátbőrét és intrakután fiziológiás sóoldattal (felső panelek) vagy bq788 (alsó panelek) injekciózták a függőleges nyilak (d) által jelzett napokon. A fehér nyilak az epilált és levágott területek bőrszínére mutatnak. E) a grafikon a hátsó bőr relatív melaninszintjét mutatja., Vegye figyelembe,hogy az 5. napon az epilálás után a piros pontozott vonal mentén a fehér pontozott vonal mentén történő vágás a környező szőrszálakat mutatja, mint a haj follikuláris pigmentációjának fiziológiai regenerálódását. id, intradermális injekció. *p < 0.05; * * p < 0.01.
megvizsgálni, Hogy EDNRB jelzés szükséges, epilálás-indukált reakciók a vissza a bőr, mi történik intradermális injekció BQ788, epilálás után a wildtype egerek. Amint az ábrán látható., 4D, míg a kontroll intradermális injekció NaCl epilálás után engedélyezett bőr hyperpigmentáció (a 0.23 ± 0.06 fold akár 1.0 ± 0.15-szeres, n = 3), injekció BQ788 jelentősen csökkent az epilálás okozta bőr pigmentáció (0.76 ± 0.1-szeres, n = 3). Ez a megállapítás azt sugallja, hogy az EDNRB farmakológiai megzavarása megakadályozhatja az epilálás által kiváltott bőr hiperpigmentációját a hátsó bőrben. Ezek az adatok együttesen azt sugallják, hogy az epilálás által kiváltott hiperpigmentációhoz EDNRB jelátvitel szükséges.,
az EDNRB befolyásolja a szőrtüszők McSC proliferációját, és szabályozza a melanogenezissel kapcsolatos génexpressziót
annak megvizsgálására, hogy az Ednrb hiánya hogyan csökkenti a bőr pigmentációját, szövettanilag elemeztük a szőrtüszők pigmentációját a fejbőrön (amely, mint említettük, az Ednrb−/− egerekben pigmentált marad, szemben a háttal). Amint az ábrán látható., 5A, a nap 5 epilálás után, haj izzók, valamint hajszálakat a Ednrb−/− egerek általában jelen van a fejbőrön, de hypopigmented azokkal szemben, wildtype egerek, ami arra utal, hogy a veszteség EDNRB nem befolyásolja a haj ciklusban, de csökkenti a melanocita számok vagy melanin-szintézist, az izzó. Valójában 7 nappal az epilálás után az ednrb−/− egerek melanoszóma száma sokkal alacsonyabb volt, mint a wildtype egereké (ábra. 5B)., Emellett a melanocita-specifikus markerek, mint PMEL17 de TYR nem lehetett kimutatni a bőrben, kilépőnyílások a hajhagymákat, vagy a interfollicular epidermisz a Ednrb−/− egerek után 5 napon epilálás, bár voltak jelenlegi alacsony szinten a haj izzók (Fig. S7C). Ezenkívül az McSC marker KIT és a pigmentált melanociták még 7 nappal az epilálás után is észrevehetetlenek maradtak (ábra. 5C és Fig. S7D). Ezek az eredmények arra utaltak, hogy az ednrb szükséges az epilálás által kiváltott epidermális melanocita regenerációhoz.,
Elvesztése EDNRB blokkok McSC migráció a felhám, csökkenti a melanocita elterjedése a haj izzó, illetve csökkenti a kifejezés egyes melanogenesis kapcsolatos gének. A) A wildtype és az ednrb−/− egerek szőrtüszőinek szövettana 5 nappal az epilálás után. A nyilak melanin granulátumot jeleznek a hajhagymában és pigmentált hajhagymában. B) wildtype és Ednrb−/− egerek Melanoszómái a hajhagymákban 7 nappal az epilálás után, transzmissziós elektronmikroszkóppal (TEM) feltárva., A nyilak jelzik a melanoszómát. C) a wildtype és az ednrb−/− egerek fejbőrének anti-KIT immunszuppressziója 3 nappal az epilálás után. Megjegyzés hiánya KIT-pozitív sejtek Ednrb – / – epidermisz 3 nappal az epilálás után. D) anti-KIT és Ki67 immunszuppresszív szőrtüszők wildtype és Ednrb – / – egerek 3 nappal az epilálás után (felső panelek) és a mennyiségi grafikon melanocita proliferáció a hajhagyma (Alsó panel). E) a wildtype és az ednrb−/− egerekből származó melanociták elsődleges tenyészeteinek képei és (F) a megfelelő sejtpelletek (felső panel) és melanin tartalom (Alsó panel)., Nyilak pont a sejt pellet. G) qRT-PCR analízis a wildtype és az ednrb-/− egerek fejbőrének melanogenezissel összefüggő génjeinek expressziójára 7 nappal az epilálás után. Epi, epidermisz; HS, haj tengely. Bar, 50 µm. *P < 0.05; * * p < 0.01.
annak elemzéséhez, hogy az EDNRB elvesztése hogyan csökkenti a hajhagymák melanin szintjét, ezután számszerűsítettük a melanocita számokat a wildtype és az ednrb−/− egerek minden hajhagymájában 7 nappal az epilálás után., A szám a MITF-pozitív sejtek epilálás után alacsonyabb volt, minden egyes szőrtüsző a Ednrb−/− egerek (11.7 ± 2.2) képest hajhagymák wildtype egerek (15.7 ± 1.43) (Fig. S7D). Ez az eredmény azt sugallta, hogy az EDNRB elvesztése megakadályozhatja a melanocita leszármazási sejtek epilálás által kiváltott proliferációját. Nemrég, Takeo et al. megállapította, hogy a fiziológiás hajregeneráció során az MSCS proliferációjához és karbantartásához is szükség van az EDNRB jelzésre29. Mindazonáltal még nem ismert, hogy az EDNRB befolyásolja-e az epilálás által kiváltott McSC proliferációt., Mivel EDN3 fejezi ki a dermális papilla közvetlen közelében érett melanociták a haj izzó, teszteltük, hogy EDN3/EDNRB jelzés érinti McSC elterjedése a dudor vagy serkenti a melanin szintézist follikuláris melanociták. A fejbőrön az anti-KIT és a Ki67 immunszuppresszáló adatok azt mutatták, hogy az epilálás után 3 nappal az Ednrb−/− egerek minden egyes hajbuborékában az McSC proliferációja (52 ± 5,2%) alacsonyabb volt, mint a wildtype egerek megfelelő dudoraiban (86,2 ± 3,5%) (ábra). 5D). Ez arra utal, hogy az ednrb az epilálás által kiváltott McSC proliferációhoz is szükséges a hajhagymában.,
ahhoz, hogy további betekintést nyerjünk a mögöttes mechanizmusokba, izoláltuk a melanocitákat az in vitro tenyésztéshez. Amint az ábrán látható. 5E, a pigmentáció Ednrb – / – primer melanociták pigmentált fej szőrtüszők P6 Ednrb−/− egerek alacsonyabb volt (0,47 ± 0,1-szeres, n = 5), mint a wildtype primer melanociták (1,0 ± 0,1-szeres, n = 5). Hasonló eredményeket kaptunk sejtpelletekben, vagy amikor a melanintartalmat közvetlenül mértük (ábra. 5F). Ezután elemeztük, hogy az EDNRB jelátvitel befolyásolja-e a melanogenezissel kapcsolatos gének expresszióját. Amint az ábrán látható., 5G, a 7 nap után epilálás, a kifejezés melanogenesis kapcsolatos gének csökkent a Ednrb−/− fejbőr, beleértve a kifejezés a Pax3 (0.47 ± 0.07 szeres, n = 3), Tyr (0.55 ± 0.05-szeres, n = 3), valamint a Tyrp1 (0.5 ± 0.02 szeres, n = 3). Ez arra utal, hogy az edn3/EDNRB jelzés mind a melanocita proliferációban, mind a melanogenezisben részt vesz az MSCS epilálás által kiváltott regeneratív válaszai során. Ezek a megállapítások együttesen azt mutatják, hogy az epilálás az edn3/EDNRB jelzésen keresztül melanogenezissel kapcsolatos gén expresszióját indukálja, ami viszont a bőr és a haj hiperpigmentációjához vezet.
Vélemény, hozzászólás?