Szállítás, Internalization: Szabad Hormon Hipotézis, illetve Hasznosulnak, Ligand
Mert a 25(OH)D lakóhelye különböző fehérjék, vagy a szabad, kötetlen, a következő szempont az a mechanizmus, amely által a 25(OH)D internalized a megcélzott sejtek, illetve szövetek. A vesében a bejutás útja megalin-mediált endocitózison keresztül történik ., A Megalin, más néven alacsony sűrűségű lipoproteinhez kapcsolódó 2 fehérje, egy nagy (600 kDa) transzmembrán multiligand receptor, amelyet több más szövet hámsejtjeiben expresszálnak. Amikor a megalint a coreceptor cubilin (460 kDa) mellett fejezik ki, képes mind a DBP, mind az ALB, mind a hozzájuk kötött D-vitamin ligandumok endocitikus internalizálására, valamint számos más fehérjére (pl. retinol-kötő fehérje, transzferrin, apolipoprotein E, epidermális növekedési faktor stb.).) ., Ebben a környezetben, de minden sejt-írja a megalin endocytosis gépek, valamint a megfelelő kifejezés a CYP27B1, a internalized a fehérjéhez–25(OH)D szolgálhat szubsztrát átalakítás 1,25(OH)2D.
A sejtek nélkül megalin, a legvalószínűbb útvonala bejegyzés a D-vitamin metabolitok a diffúzió a szabad formák ezek a metabolitok, bár több jelentést alacsony szintje nonmegalin sejt egyesület felvétele DBP egyes sejtek . Kísérletileg azonban a szabad metabolit belépési útvonalának elsőbbségét 1,25(OH)2D-re igazolták keratinocitákban ., Az immunsejteket alkalmazó további vizsgálatokban a tenyészetben a DBP növekedése csökkentette az érzékenységet 25(OH)D-re (ahol 1,25(OH)2D-t helyben termeltek) a tapadó monocitákban és dendritikus sejtekben, összhangban a “szabadhormon” hipotézissel .
azt is feltételezték, hogy a kifejezetten nem kötött molekulák mellett a sejtek alacsonyabb affinitással kötődő D-vitamin metabolitokat is felhasználhatnak az ALB-hez. Ebben a beállításban a 25(OH)D” biológiailag elérhető ” frakciót úgy számítjuk ki, hogy előre megjósoljuk az ALB-hez kötött frakciót plusz a szabad 25(OH)D-t (lásd az ábrát. 51.1) ., Ezt a számítást a biológiailag hozzáférhető 25 (OH) d állapotra, valamint egy közvetlen intézkedést a szabad 25(OH)D-re vonatkozóan számos epidemiológiai asszociációs vizsgálatban alkalmazták, amelyek közül néhányat később tárgyalunk ebben a fejezetben. A biológiailag elérhető vagy szabad hormon fogalmát korábban alkalmazták a kortizolra, a pajzsmirigyre, a tesztoszteronra és az ösztrogénre (lásd 51.1.táblázat). Ezekben az esetekben a megfelelő nagy affinitású kötő fehérje, a kortizolkötő globulin (CBG), a pajzsmirigyhormon-kötő globulin (TBG) vagy a nemi hormonkötő globulin (SHBG) a teljes szérum–keringő hormon jelentős részét szekvenálja., A fennmaradó rész szabad vagy kötődik alacsonyabb affinitással az ALB-hez, valamint a pajzsmirigyhormon esetében a transztiretinhez.
ezeknek a kölcsönhatásoknak a dinamikája, egy többmagos, többkötésű fehérje egyensúly, matematikailag leírható . Ebből a szempontból az elvárás az, hogy a 25(OH)d státuszt (vagy bármely érdekes ligandum státuszt) három mutatóval lehet megfelelően leírni: (1) összesen 25(OH)D; (2) biológiailag elérhető 25(OH)D; és (3) ingyenes 25(OH)D., A kivétel ez lenne a forgatókönyv, ahol az egyének az azonos teljes ligandum koncentráció alatt tanulmány is nagyon különböző biológiai, valamint ingyenes ligand szinten, ha a rokonértelmű párja kötő fehérje szinten különbözött egymástól. A DBP esetében a normál egészséges egyéneknél a DBP koncentráció változási tartománya kissé keskeny. Így a teljes 25(OH)D szint valószínűleg összefüggésbe hozható a lockstepben a biológiailag hozzáférhető és a szabad 25 (OH)d szinttel. A hormonkötő fehérjék (CBG, TBG és SHBG) azonban a populációkban valamivel szélesebb koncentrációt mutatnak (lásd 51.1.táblázat)., Ennek az a következménye, hogy a teljes ligandum-koncentráció jelentősen eltérhet a biológiailag hozzáférhető és szabad ligandum-koncentrációktól. Így ezeknek a hormonoknak a szabad és biológiailag elérhető értékei klinikai hasznossággal is rendelkezhetnek.
mint már említettük, a DBP-szintek jellemzően egészséges egyénekben nem mutatnak nagy eltérést, de vannak fiziológiai (terhesség) és kóros (májbetegség) állapotok, ahol a DBP-szintek megváltoznak . Ilyen körülmények között lehetséges, hogy a szabad és biológiailag hozzáférhető értékek klinikai hasznosságot mutatnak a teljes szérumméréshez képest., Ennek a forgatókönyvnek a szélsőséges példáját a DBP knockout mouse modell mutatja be . Ebben a vizsgálatban DBP (+/+) egereket hasonlítottak össze DBP (+/−) és DBP (−/−) egerekkel. A 25(OH)D és 1,25 (OH)2D szintet mértük, és a DBP ( + / + ) egereknél a DBP ( + / − ) metabolitok jellemző szintje csökkent, míg a DBP ( − / − ) mennyiségben alig volt kimutatható. A D − vitamin − státusz markereként alkalmazott teljes szérumszint azt jelzi, hogy a DBP ( + / − ) és a Dbp ( – / – ) érték csökkent, illetve súlyosan hiányos volt., Az egyes állatfajok csontminősége azonban normális volt. Csak akkor figyeltek meg különbségeket, amikor az állatokat D-vitamin-hiányos étrendbe helyezték, úgy, hogy a DBP ( − / -) másodlagos hyperparathyreosisot és csont anomáliákat mutatott gyorsabban, mint vad típusú társaik. Így a DBP knockout egér modellben a teljes szérum metabolitszint nem volt pontos a D-vitamin állapotának biomarkerei.
egy másik egérkísérletben, vad típusú (azaz, A DBP ( + / + ) egereket kizárólag D2 (D2) vagy D3 (D3) vitamint tartalmazó étrenddel táplálták az elválasztástól a 8 .hétig és a 16. hétig úgy, hogy végül az egerek összes releváns metabolitja kizárólag D2 vagy D3 formájú volt. A 8 .és a 16. héten ezeknek az egereknek a teljes szérum 25(OH)d szintje hasonló volt, de a D2 táplált egerekben a fizikailag mért szabad 25(OH)d szintek valószínűleg magasabbak voltak, mivel a DBP affinitása 25(OH)D2-re csökkent a 25(OH)D3-hoz képest., Érdekes módon a 16. héten a D2-vel táplált egerek szignifikánsan magasabb BV/TV és trabekuláris számot mutattak, mint a D3-vitamin étrenddel táplált egerek. A 8. héten a D2 egereknél szignifikánsan magasabb volt az oszteoklaszt felület/csont felület, az erodált felület/csont felület, valamint az ásványi összetétel aránya a D3 egerekhez képest. A 8. héten az osteoblast felülete/csontfelülete magasabb volt a D2 nőstényeknél, de nem a 8.héten D2 hímek. A tanulmány eredményei arra utalnak, hogy a szabad 25(OH)D hatással lehet a csontváz funkciójának egyes aspektusaira, és talán jobb D-vitamin-státusz markere ebben a környezetben egereknél., Ebben a fejezetben később tárgyaljuk azt a kérdést, hogy a free 25(OH)D hasznos biomarker az emberi egészség számára.
Vélemény, hozzászólás?