6.4 B: Pure Culture (Italiano)

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Obiettivi formativi

  • Descrivi come le colture microbiche pure possono essere coltivate in un mezzo di crescita basato su agar

Le colture microbiche sono metodi diagnostici fondamentali e di base ampiamente utilizzati come strumento di ricerca in biologia molecolare. Spesso è essenziale isolare una coltura pura di microrganismi. Una coltura pura (o axenica) è una popolazione di cellule o organismi multicellulari che crescono in assenza di altre specie o tipi., Una coltura pura può provenire da una singola cellula o da un singolo organismo, nel qual caso le cellule sono cloni genetici l’uno dell’altro. Ai fini della gelificazione della coltura microbica, viene utilizzato il mezzo di gel di agarosio (agar). L’agar è una sostanza gelatinosa derivata dalle alghe. Un sostituto economico per l’agar è la gomma di guar, che può essere utilizzata per l’isolamento e il mantenimento dei termofili.

Figura: Selective Media: Geomyces destructans in culture from bat tissues., (A) Provette di coltura originali di agar Sabouraud integrate con nove antibiotici e incubate a 4°C per sei o otto settimane; si noti la crescita abbondante dei ceppi di G. destructans. (B) Una certa contaminazione fungina su singoli isolati era visibile come raffigurato nel primo piano di un tubo di coltura. C) Arricchimento e recupero di colonie fungine pure mediante il trattamento di una coltura contaminata da batteri con acido cloridrico.

Le colture microbiologiche possono essere coltivate in piastre di petri di diverse dimensioni che hanno un sottile strato di terreno di crescita a base di agar., Una volta che il mezzo di crescita nella capsula di petri viene inoculato con i batteri desiderati, le piastre vengono incubate alla temperatura migliore per la crescita dei batteri selezionati (ad esempio, di solito a 37 gradi Celsius per le colture di esseri umani o animali o inferiori per le colture ambientali). Un altro metodo di coltura batterica è la coltura liquida, in cui i batteri desiderati sono sospesi in brodo liquido, un mezzo nutritivo. Questi sono ideali per preparazione di un’analisi antimicrobica., Lo sperimentatore inoculerebbe il brodo liquido con i batteri e lo lascerebbe crescere durante la notte (possono usare uno shaker per una crescita uniforme). Quindi avrebbero preso aliquote del campione per testare l’attività antimicrobica di un farmaco o di una proteina specifica (peptidi antimicrobici). In alternativa, il microbiologo può decidere di utilizzare colture liquide statiche. Queste culture non vengono scosse e forniscono ai microbi un gradiente di ossigeno.

Punti chiave

  • Una coltura pura può provenire da una singola cellula o da un singolo organismo, nel qual caso le cellule sono cloni genetici l’uno dell’altro.,
  • Le colture microbiche sono metodi diagnostici fondamentali e di base ampiamente utilizzati come strumento di ricerca in biologia molecolare.
  • La forma più comune di colture microbiche sono liquidi o solidi ( agar ).

Key Terms

  • agar: Un materiale gelatinoso ottenuto dalle alghe marine, utilizzato come mezzo di coltura batterica, in elettroforesi e come additivo alimentare.

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