Frontiers / Testosterone modifica le alterazioni del muscolo detrusore dopo l'ostruzione parziale dell'uscita della vescica nei topi giovanili / pediatria

Introduzione

Le valvole uretrali posteriori (PUV) sono la causa congenita più comune dell’ostruzione dell’uscita della vescica pediatrica (1). Mentre il tasso di mortalità da PUV è migliorato significativamente con la moderna gestione medica, l’uropatia ostruttiva rimane ancora una fonte significativa di morbilità nell’età adulta (2). Fino all ‘ 80% dei bambini con PUV mostra sintomi di incontinenza e infezioni del tratto urinario (3)., Inoltre, fino al 50% dei bambini con PUV svilupperà insufficienza renale, con uropatia ostruttiva la causa congenita più comune di trapianto renale (4). I volantini della valvola ostruttiva vengono trattati chirurgicamente subito dopo la nascita; tuttavia, i bambini con PUV svilupperanno variabilità nella funzione della vescica urinaria per tutta la vita. È stato dimostrato che il deterioramento della vescica si verifica spesso dopo la pubertà, con una crescente necessità di cateterizzazione intermittente pulita (5).

Studi che utilizzano vari modelli animali hanno dimostrato che la vescica è ormonalmente sensibile., In particolare, la sostituzione del testosterone ha dimostrato di aumentare la massa muscolare liscia e il rapporto tra muscolo liscio e collagene nei ratti orchiectomizzati (6). È stato studiato un modello di ostruzione parziale dell’uscita della vescica in topi maschi e ha dimostrato di produrre ipertrofia muscolare del detrusore della vescica (7). Il testosterone ha dimostrato di aumentare la fibrosi del detrusore in risposta alla lesione da ischemia-riperfusione nei conigli castrati (8). Tuttavia, ad oggi, l’effetto delle manipolazioni ormonali sulla risposta della vescica del topo maschile alle lesioni prodotte dall’ostruzione deve ancora essere studiato., Pertanto, ipotizziamo che il testosterone partecipi ai cambiamenti fibrotici disadattivi che si verificano dopo l’ostruzione della vescica.

Materiali e metodi

Murino parziale vescica uscita ostruzione Modello

Tutte le procedure chirurgiche sono state approvate dal Animal Care and Use Committee del Stanley Manne Children’s Research Institute. I topi maschi CD1 da otto a dieci settimane (Charles River Labs, Chicago, IL, USA) sono stati alloggiati in gabbie separate per evitare cambiamenti ai livelli di testosterone causati dagli alloggi di gruppo. I topi sono stati anestetizzati con il 3% di isoflurano e posizionati supini., L’addome inferiore è stato rasato e preparato con soluzione di providone-iodio. Dopo aver assicurato un’induzione soddisfacente dell’anestesia, è stata praticata un’incisione cutanea addominale inferiore della linea mediana e trasportata attraverso la parete addominale. L’ostruzione dell’uscita della vescica è stata effettuata in modo simile a un rapporto precedente, ma con alcune differenze (ostruzione parziale o gruppo PO) (7). Si prega di notare che l’ostruzione parziale è in genere indicato come” pBOO, ” tuttavia, ci riferiremo alla chirurgia e gruppo sperimentale come PO., Con la trazione verso l’alto sulla vescica, la dissezione smussata intorno al collo della vescica (prossimale alla prostata nei topi maschi) è stata effettuata mentre occasionalmente ritraeva la vescica caudalmente per garantire che la dissezione fosse anteriore agli ureteri. Una sutura in polipropilene 7-0 è stata quindi passata attorno al collo della vescica e legata su un ago calibro 23 posizionato vicino all’uretra. L’ago è stato quindi rimosso., Se gli animali maschi dovevano essere castrati (ostruzione parziale castrata o CPO), contemporaneamente i testicoli venivano portati fuori dall’incisione addominale, le corde spermatiche legate con 6-0 punti di sutura in polipropilene e nettamente divise. La parete addominale e la pelle sono state quindi chiuse separatamente con 5-0 suture di poliglactina in modo interrotto. Gli animali finti hanno subito una procedura identica fino al punto di mobilizzazione della vescica. Gli animali sono stati autorizzati a recuperare, purché carprofene disciolto in acqua potabile e sacrificato a 1 o 4 settimane dopo gli studi funzionali descritti di seguito., Dopo il sacrificio per lussazione della colonna cervicale in anestesia isoflurano, gli animali sono stati pesati e le vesciche sono state sezionate a livello della legatura. Ogni vescica è stata svuotata di urina e poi pesata separatamente per topi 12 sham, 17 PO, 11 CPO e 11 CPOT.

Somministrazione di testosterone

Il testosterone cypionate è stato somministrato al gruppo castrato, parzialmente ostruito al momento della castrazione e settimanalmente postoperatorio alla dose di 10 mg / kg (castrato ostruzione parziale testosterone o gruppo CPOT)., Per i topi sottoposti a sostituzione del testosterone, il sangue è stato prelevato al momento del sacrificio e inviato per il test di testosterone commerciale per garantire che ricevessero una sostituzione adeguata (Antech Diagnostics, Irvine, CA, USA).

Annullamento della macchia su carta (VSOP)

Il VSOP è stato eseguito la mattina dei giorni postoperatori 1, 7 e 28 per ciascun mouse. I topi sono stati mantenuti in gabbie metaboliche con carta da filtro Whatman sottostante per 2 h e dato accesso illimitato al cibo e all’acqua. I fogli di carta da filtro sono stati fotografati., È stato notato il numero e il modello di vuoti e l’area di ogni macchia di vuoto è stata misurata utilizzando ImageJ (National Institutes of Health, Bethesda, MD, USA). Utilizzando una curva standard creata dall’eliminazione delle macchie da volumi noti di urina, l’area della macchia è stata convertita in volume svuotato. Max volume vuoto è stato analizzato.

Analisi istologica

Le vesciche sono state fissate al 10% (p / v) di formalina (Sigma) per 24 h, incorporate in paraffina e tagliate trasversalmente con il collo della vescica orientato verso il basso per produrre sezioni di 4 µm. Sezioni di topi 4 sham, 4 PO, 4 CPO e 4 CPOT sono state macchiate con il tricromo di Masson., Le sezioni sono state riprese con ingrandimenti di 10× e 40× utilizzando un microscopio verticale Leica collegato a una fotocamera e le immagini sono state archiviate digitalmente utilizzando OpenLab per Mac. Il rapporto Col/SM è stato quantificato utilizzando Adobe Photoshop come descritto in precedenza e calcolato in media da quattro sezioni 40× per vescica. Per l’immunotenente, le vesciche sono state fissate nel 4% (p/v) di formaldeide a base di paraformaldeide (EM Sciences) durante la notte. Il tessuto è stato lavato in DPBS ed equilibrato sequenzialmente nel 20% (p/v) e nel 30% (p/v) di saccarosio (Sigma) in DPBS., I tessuti sono stati congelati in stampi peel-away contenenti OCT (Tissue Tech) in un bagno di ghiaccio secco isopentano (Sigma).

Anticorpi immunofluorescenza

Vesciche fisse da 3 topi sham, 3 PO, 3 CPO e 3 CPOT sono stati utilizzati. Sezioni di 10 µm da sono state tagliate per tutti gli esperimenti. Le sezioni sono state lavate due volte in PBS, incubate per 5 min a temperatura ambiente in PBS + 0,1% Tween (PBT) e bloccate per 30 min a temperatura ambiente con siero d’asino al 10% in PBT., La miosina della muscolatura liscia (SMM) è stata rilevata allo stesso modo utilizzando la miosina della muscolatura liscia del coniglio (Tecnologie biomediche, 1:100) in combinazione con l’anticorpo secondario Alexa Fluor 546 donkey anti-rabbit (Life Technologies, 1:400).

Analisi statistica

I gruppi sono stati confrontati utilizzando ANOVA con l’analisi post hoc Student–Newman–Keuls. I risultati con P < 0.05 sono stati considerati significativi. SPSS v22.0 è stato utilizzato per l’analisi statistica. Le barre di errore nelle figure riflettono SEM.,

Risultati

PO porta a cambiamenti funzionali determinati da studi urodinamici e macchia invalidante su carta

L’ostruzione parziale dell’uscita della vescica è stata eseguita su topi CD-1 maschi e confrontata con due gruppi: topi maschi sottoposti a chirurgia fittizia e topi maschi sottoposti a ostruzione parziale dell’uscita della vescica con castrazione. Abbiamo misurato i livelli sierici di testosterone nei topi castrati e abbiamo scoperto che i livelli sono scesi a (<20 pg/dL) entro 24 ore dopo l’orchiectomia., Gli effetti dell’ostruzione sulla funzione della vescica sono stati determinati utilizzando studi urodinamici in questi tre gruppi. La figura 1A dimostra pressioni di svuotamento di picco elevate 1 settimana post-ostruzione nei topi PO e CPO rispetto ai topi sham surgery. I tracciati urodinamici rappresentativi dimostrano anche instabilità a 1 settimana nei topi PO e CPO (Figura 1C). VSOP eseguito a 1 settimana dopo l’ostruzione riflettono l’effetto dell’ostruzione sui topi PO e CPO che non si vede nei topi di chirurgia fittizia (Figure 1B,D)., Pertanto, il nostro modello di PO ha avuto effetti funzionali significativi sulla minzione sia nei topi PO che CPO 1 settimana dopo l’intervento chirurgico.

FIGURA 1

Figura 1. Cistometria (A) e volumi massimi vuoti medi (B) da topi 1 settimana dopo essere stati sottoposti a PO. Le colonne sono (da sinistra a destra) Sham, PO, CPO. C) Tracce rappresentative dall’analisi della cistometria. (D) Immagini rappresentative di macchie di svuotamento su carta Whatman poste sotto i topi per 2 h come visualizzate con imaging ultravioletto. Le barre di errore sono SEM., La significatività statistica (P < 0.05) è indicata sopra le barre con un asterisco.

Sebbene l’ostruzione nei topi CPO sia stata dimostrata a 1 settimana, gli effetti dell’ostruzione sono stati risolti entro 4 settimane. VSOP fatto a 4 settimane post-ostruzione dimostrano che i topi PO hanno modelli di svuotamento ostruttivo persistenti con volumi massimi vuoti più piccoli rispetto ai topi CPO. Allo stesso tempo, i topi CPO recuperano volumi vuoti massimi simili ai topi di chirurgia fittizia (Figure 3A–C)., Il modello complessivo su VSOP di topi CPO sono tornati alla normalità, mentre i topi PO continuano a dimostrare irrorazione indiscreta di urina che indica la perdita di controllo della vescica.

Il rimodellamento della vescica dopo PO è alterato dalla castrazione

Abbiamo scoperto che gli effetti sulla funzione della vescica erano correlati con cambiamenti macroscopici nella vescica del topo su topi PO e CPO. Al momento del sacrificio del topo alle 4 settimane successive all’OP, le vesciche fittizie apparivano di dimensioni normali, ma la vescica di PO e CPO era grossolanamente ingrandita (Figure 2A,C–E)., Dopo la dissezione della vescica distale alla legatura del collo della vescica, le vesciche sono state espresse di urina e pesate. Qui, abbiamo trovato un aumento del peso della vescica nei topi PO rispetto sia alla chirurgia finta che ai topi CPO. I topi CPO non hanno dimostrato un aumento di peso rispetto ai topi sham surgery (Figura 2B). La valutazione istologica delle vesciche di questi topi è stata eseguita con H&E colorazione e area della vescica, circonferenza e spessore sono stati confrontati., Sia i topi CPO che PO hanno dimostrato un aumento dell’area e della circonferenza rispetto ai topi sham surgery, riflettendo i cambiamenti dovuti a pressioni vescicali elevate dopo PO (Figure 2F,H). Tuttavia, l’aumento dello spessore della vescica è stato osservato solo nei topi PO (Figura 2G). Questo è correlato con i pesi della vescica più bassi nei topi CPO, suggerendo che l’aumento delle dimensioni della vescica è dovuto principalmente allo “stiramento” del muscolo della vescica rispetto alla vera ipertrofia o iperplasia del muscolo della vescica.

FIGURA 2

FIGURA 3

Figura 3., Cistometria (A) e volumi medi max annullati (B) 4 settimane dopo Sham o PO. (C) Immagini rappresentative di macchie di svuotamento da topi Sham, PO o CPO 1 e 4 settimane dopo l’intervento chirurgico. Le barre di errore sono SEM. La significatività statistica è indicata sopra le barre con asterischi (**P < 0.01). NS indica che la differenza non era statisticamente significativa.,

La fibrosi vescicale aumenta a seguito di Ostruzione parziale dell’uscita vescicale

Al fine di verificare se l’aumento della massa vescicale e dello spessore della parete vescicale fosse dovuto esclusivamente all’ipertrofia / iperplasia muscolare o se fosse coinvolto un componente della fibrosi, è stato eseguito un esame istologico delle vesciche di topo sham, PO e CPO alle 4 settimane successive all’ostruzione. Questo è stato fatto utilizzando sia la colorazione tricromatica di Masson che l’immunofluorescenza specifica per i marker di fibrosi (Figura 4)., Come previsto, nei topi PO, in seguito all’ostruzione, le vesciche hanno riscontrato un aumento dei rapporti Col/SM. Con la castrazione, il rapporto Col/SM aumentato non è più stato trovato (Figura 4B). Anche se il volume della vescica luminale è stato aumentato nei topi CPO, lo strato muscolare non ha dimostrato ipertrofia come evidenziato avendo lo stesso spessore della parete della vescica come topi chirurgia farsa. Inoltre, la valutazione dei marcatori specifici della fibrosi Vimentina, Col1a1 e FSP-1 mediante immunofluorescenza ha dimostrato un aumento dell’espressione nei topi PO rispetto ai topi fittizi, con una corrispondente diminuzione dell’espressione nei topi CPO., Sembra che la castrazione crei condizioni in cui si verifica il rimodellamento della vescica non fibrotica, sostenendo un potenziale ruolo del testosterone in particolare nel mediare una risposta fibrotica alla lesione della vescica.

FIGURA 4

Figura 4. Presenza di proteine fibrotiche nella parete della vescica dopo PO. (A) Grafico a barre che mostra la fluorescenza media dell’area percentuale per Col1a1. Il significato è indicato da * * * P <0.001 o ****P< 0.0001. (B) Grafico a barre che mostra il rapporto Col/SM nelle vesciche Sham, PO e CPO., Il significato è indicato da *P < 0.05. (C) Immagini rappresentative di immunofluorescenza per Vimentina, Col1a1, FSP-1 e tricromia di Masson. La macchia dell’anticorpo è rossa e la contro-macchia di DAPI è blu. Le file di pannelli sono sezioni da (dall’alto verso il basso) Sham, PO e CPO. Le righe sono indicate a sinistra. La barra di ingrandimento nel pannello in alto a sinistra è di 100 µm e rappresenta l’ingrandimento per tutti i pannelli.,

Introduzione di Testosterone Esogeno Inverte gli Effetti Benefici della Castrazione a seguito di Parziale Ostruzione della Vescica

Abbiamo dimostrato che la castrazione nell’impostazione del PO sarà attenuare la post-ostruttiva rimodellamento in relazione alla vescica ipertrofia/iperplasia e fibrosi. Per dimostrare che si tratta di una risposta specifica per il testosterone, dopo la castrazione, una coorte di topi ha subito una supplementazione di PO e testosterone. Qui, abbiamo usato testosterone o il suo prodotto ridotto diidrotestosterone (DHT)., DHT ha 10 volte l’affinità per il recettore degli androgeni rispetto al testosterone e non può essere aromatizzato agli estrogeni, riducendo la probabilità che i cambiamenti che si verificano dalla supplementazione di testosterone siano dovuti all’aumento dei livelli di estrogeni. I volumi max annullati determinati da VSOP erano significativamente inferiori nei topi CPO plus testosterone (CPOT) o CPO plus DHT (CPOD) rispetto ai topi CPO (Figura 5A). I cambiamenti macroscopici e microscopici osservati nei topi PO (ma non nei topi CPO) sono riapparsi nelle vesciche CPOT e CPOD., Il peso della vescica è stato significativamente aumentato nei topi CPOT e CPOD rispetto ai topi CPO (Figura 5B). Anche le vesciche CPOT e CPOD avevano rapporti Col/SM aumentati rispetto al CPO (Figura 5D). I marcatori di fibrosi sono stati anche aumentati in CPOT e CPOD rispetto alle vesciche CPO così come la reazione alla macchia tricromatica di Masson (Figure 5C,E). Questi risultati dimostrano che la sostituzione esogena del testosterone nei topi maschi castrati ha completamente ripristinato gli effetti patologici dell’ostruzione alla vescica urinaria., In sintesi, gli effetti della castrazione e della sostituzione del testosterone supportano fortemente un ruolo per l’androgeno maschile nella patogenesi dell’ostruzione della vescica.

FIGURA 5

Discussione

I ragazzi nati con PUV vengono sottoposti a resezione chirurgica dei volantini ostruttivi subito dopo il parto. Tuttavia, nonostante allevii l’ostruzione dell’uscita della vescica in questi bambini, molti pazienti con PUV progrediscono al deterioramento della vescica che richiede un cateterismo intermittente pulito per svuotare adeguatamente la vescica (3). Questi cambiamenti sono stati spesso osservati dopo la pubertà., I cambiamenti clinici nei pazienti con valvole resecate sono stati precedentemente attribuiti a cambiamenti fisiologici associati all’adolescenza come aumento della filtrazione urinaria e non a cambiamenti ormonali (1, 5, 9). Tuttavia, i nostri risultati suggeriscono che l’androgeno può svolgere un ruolo più importante di quanto precedentemente apprezzato. Troviamo che la presenza o l’assenza di androgeni influenza specificamente i cambiamenti cellulari che si verificano dopo l’ostruzione, in particolare la fibrosi.,

Le informazioni provenienti da studi in cui il testosterone è stato integrato in pazienti con malattia del tratto urinario inferiore potrebbero fornire informazioni sugli effetti degli androgeni sulla malattia della vescica. Questi dati sono relativamente scarsi, provenienti in gran parte da studi osservazionali retrospettivi o prospettici e studi in cui il testosterone è stato somministrato a uomini ipogonadici o eugonadici. Tuttavia, questi studi suggeriscono che la supplementazione di testosterone non peggiora LUTS (10, 11)., Specificamente, gli studi multipli hanno dimostrato un miglioramento nel punteggio di IPSS in uomini che ricevono il completamento dell’androgeno, sebbene molti di questi non studiassero specificamente gli uomini con ostruzione nota dello sbocco della vescica, ma piuttosto includano una coorte trattata con il completamento del testosterone ed avendo vari gradi di LUT alla linea di base. Uno studio ha escluso quei pazienti con nota ostruzione del collo vescicale. Koritsiadis et al., ha confrontato specificamente i sintomi e i parametri urodinamici sugli studi di pressione-flusso di uomini ipogonadici ed eugonadici e ha trovato che il livello di testosterone sierico è correlato negativamente con la pressione del detrusore al flusso massimo, ma non IPSS o altri parametri urodinamici (12).

L’effetto del testosterone sul muscolo detrusore della vescica è stato studiato anche in modelli animali. Tek e colleghi hanno scoperto che la supplementazione di testosterone di ratti castrati chirurgicamente ha comportato una diminuzione del rapporto tra collagene e muscolatura liscia e un aumento della capacità cistometrica (13). Shortliffe et al., (14) ha scoperto che la sostituzione del testosterone nei ratti castrati chirurgicamente era anche associata ad un aumento della muscolatura liscia della vescica e ad un aumento della massa della vescica (14). Insieme questi studi indicano che nei ratti non ostruiti, il testosterone stimola la crescita della muscolatura liscia del detrusore attraverso un meccanismo ancora poco chiaro. In un modello di lesione alla vescica di ischemia-riperfusione nei conigli maschi, Chuang et al. ha dimostrato che la castrazione era protettiva diminuendo la fibrosi della vescica e diminuendo l’espressione di vari marcatori correlati alla fibrosi (8)., La supplementazione di testosterone di questi conigli castrati ha portato ad un aumento della fibrosi del detrusore a seguito di lesioni alla vescica. I nostri risultati rispecchiano questi risultati e rappresentano il primo studio sull’effetto del testosterone sulla risposta alla lesione della vescica da PO nei topi giovanili.

Allo stesso tempo, la scarsità di risultati in letteratura ci ha sorpreso dai nostri risultati iniziali. Una potenziale preoccupazione che avevamo era che i topi non erano sufficientemente ostruiti e che i nostri risultati nei topi castrati rappresentavano un gruppo in cui l’ostruzione semplicemente non si verificava., Alla fine, sappiamo che questo non è vero perché le vesciche nel gruppo CPO inizialmente avevano macchie invalidanti come il gruppo ostruito, avevano pressioni anormali per cistometria e avevano vesciche rimodellate. In effetti, le vesciche dei topi CPO erano molto diverse dalle shams, indicando che la chirurgia PO ha prodotto effetti profondi. La nostra interpretazione di questi risultati è che nelle ore successive all’intervento, la pressione aumenta all’interno della parete della vescica e che, nei topi normali, i collageni e altre matrici di irrigidimento sono costruiti per prevenire la rottura della vescica nell’addome., Vesciche da topi CPO avevano molto poco deposizione di collagene all’interno del muscolo detrusore, ma allo stesso tempo, è diventato molto grande con pareti sottili. È possibile che quando la risposta fibrotica è compromessa in una vescica ad alta pressione, si estende per accogliere l’urina che si accumula. Questo è tipico di ciò che abbiamo osservato in CPO, ma non nelle vesciche PO e CPOT. Quindi, ipotizziamo che il ruolo del testosterone possa essere specificamente nel mediare la fibrosi nella parete della vescica.,

Mentre il nostro lavoro ha utilizzato specificamente un modello della vescica per determinare il ruolo del testosterone sulla fibrosi muscolare in risposta alla lesione della muscolatura liscia, crediamo che questa ricerca si rivelerà importante in molti processi di malattia fibrotica che hanno un’associazione sessuale. In realtà, questo è stato supportato da alcuni studi in letteratura. Cho et al. ha dimostrato che l’orchiectomia attenua la fibrosi renale osservata dopo ostruzione ureterale. In un modello murino di ostruzione ureterale unilaterale, i reni di topi maschi hanno dimostrato una maggiore espressione di alfa-SMA e deposizione di collagene (15)., Simile al nostro modello di ostruzione vescicale, questa risposta fibrotica è stata ridotta al minimo se l’orchiectomia concomitante è stata eseguita con ostruzione ureterale. Risultati analoghi sono stati riportati in un modello murino di fibrosi cardiaca secondaria a sovraccarico di pressione. Qui, i cambiamenti fibrotici nel ventricolo sinistro sono stati attenuati dall’orchiectomia. Ciò includeva un ottundimento della via di segnalazione TGFß, nota per essere importante per promuovere la differenziazione dei miofibroblasti (16). Anche la fibrosi cardiaca e renale correlata all’età è stata attenuata dall’orchiectomia nei topi maschi (17)., Inoltre, in uno studio condotto da Zhu e colleghi, il recettore degli androgeni sulle cellule muscolari lisce vascolari è stato implicato nella calcificazione della muscolatura liscia stimolata dal testosterone. Usando cellule muscolari lisce vascolari derivate da un topo knockout del recettore androgeno specifico per il muscolo liscio, la calcificazione è stata attenuata in risposta al trattamento con testosterone rispetto alle cellule muscolari lisce di tipo selvaggio (18). Pertanto, un numero crescente di studi, incluso il nostro, sta trovando un’associazione tra il testosterone e i cambiamenti patologici associati alla fibrosi.,

Il meccanismo alla base del ruolo del testosterone nel modulare la risposta del detrusore alla lesione rimane inspiegabile. Ulteriori lavori che indagano gli effetti a valle del testosterone nel muscolo detrusore potrebbero rivelare nuovi obiettivi terapeutici che potrebbero essere utilizzati per prevenire o almeno migliorare il rimodellamento del tessuto avverso visto nell’ambiente di PO. Inoltre, studi dose–risposta potrebbero essere condotti per determinare a quali concentrazioni sieriche di testosterone portano al rimodellamento avverso. L’estrogeno è stato indicato per attenuare l’ipossia del tessuto e la lesione associata del detrusore nei modelli animali., Un ulteriore studio dell’interazione tra testosterone ed estrogeni nel modulare la risposta muscolare del detrusore alla lesione può anche aiutare a chiarire ulteriormente questo percorso.

Conclusione

I topi maschi giovanili con ostruzione parziale della vescica hanno vesciche ad alta pressione più piccole che sono fibrotiche. La castrazione era associata a volumi vuoti maggiori, peso della vescica inferiore e meno fibrosi del detrusore. La sostituzione del testosterone nei topi castrati ha invertito questi effetti., Ciò indica che il testosterone svolge un ruolo nella modifica delle alterazioni del muscolo detrusore dopo l’ostruzione parziale della vescica nei topi. Pertanto, suggeriamo che un aumento dei livelli di testosterone nei ragazzi con PUV possa contribuire alla diminuzione della funzione della vescica.

Dichiarazione etica

Questo studio è stato condotto in conformità con le raccomandazioni delle linee guida chirurgiche, del Comitato per la cura e l’uso degli animali. Il protocollo è stato approvato dal Comitato per la cura e l’uso degli animali.

Contributi dell’autore

AF, PF, DB, NK e GS raccolta e analisi dei dati., AF, PF, RD, e ad ESEMPIO concezione, progettazione e scrittura manoscritta.

Dichiarazione sul conflitto di interessi

Gli autori dichiarano che la ricerca è stata condotta in assenza di relazioni commerciali o finanziarie che potrebbero essere interpretate come un potenziale conflitto di interessi.

Finanziamento

Questa ricerca è stata sostenuta da finanziamenti dell’Associazione Hartwell ad ES.

4. Holmdahl G, Sillen U. Ragazzi con valvole uretrali posteriori: esito riguardante la funzione renale, la funzione della vescica e la paternità all’età di 31 a 44 anni., J Urol (2005) 174(3):1031–4; discussion 1034. doi:10.1097/01.ju.0000170233.87210.4f