Epilare induce părului și a pielii, hiperpigmentare în C57BL/6J șoareci
în General, foliculii de par pe fața dorsală piele de soareci afișa un sincronizate prima păr cycle15., Foliculii de păr de pe întreaga piele dorsală sunt de obicei în anagen din ziua 1-12 postnatală, în catagen din ziua 16-19 și în telogen ulterior până la următoarea anagen11, 22, 23. Pentru a vizualiza modificările pigmentării pielii în timpul ciclului părului postnatal, am depilat trunchiul dorsal și regiunile capului șoarecilor C57BL / 6J în ziua 11 postnatală (P11) (stadiul anagen VI în primul ciclu de păr), P21 (stadiul telogen), respectiv P30. Așa cum se arată în Fig. 1A, întreaga piele a fost omogen negru la P11 și omogen roz la P21., Intrigant, cu toate acestea, la P30, pielea scalpului era încă roz, în timp ce pielea din spate era neagră (Fig. 1a). Aceste date indică faptul că, deși McSCs în scalpului, foliculii de par se diferențieze în melanocitele mature în timpul primului ciclu de păr, ele nu sunt activate pentru a regenera melanocite la un moment de timp când foliculii de par sunt deja în faza anagenă de-al doilea ciclu de păr. Prin urmare, am testat dacă epilarea ar putea activa McSCs la nivelul scalpului în acest moment., Acest tratament de epilare a indus în mod semnificativ expresia factorilor inflamatori, dar nivelul lor este mult mai scăzut decât cel indus de rănirea plăgii, sugerând că epilarea induce doar o formă ușoară de leziune a pielii (Fig. S1). Interesant, atunci când firele de păr ale scalpului C57BL/6J șoarecii au fost epilated la P21 (după cum sa menționat, în telogen etapa de primul ciclu de păr), scalp pigmentare a crescut semnificativ (6.06 ± 1.5 ori, n = 9) deja 7 zile mai târziu, la P28 (Fig. S2A, B) și zona de epilare a produs o insulă pigmentată (Fig. 1b)., În mod corespunzător, firele de păr regeneratoare induse de epilare au fost hiperpigmentate (2,68 ± 0,87 ori, n = 5) comparativ cu firele de păr ale controalelor neepilate (Fig. 1C, D). Aceste rezultate indică faptul că în scalp, epilarea poate induce repigmentarea prematură a pielii și hiperpigmentarea părului.
Epilare induse de piele și păr hiperpigmentare în C57BL/6 șoareci., (A) imagini ale șoarecilor de control la vârstele indicate înainte (panourile superioare) și imediat după (panourile inferioare) tăierea părului pentru a dezvălui pigmentarea pielii. Rețineți că în timpul primului ciclu de păr postnatal, culorile scalpului și ale pielii din spate diferă. Săgețile indică culoarea diferită a pielii scalpului la P11 și P30. (B) scalpul șoarecilor epilat la P21 și observat la P28 înainte (panourile superioare) sau după tăierea de-a lungul liniei punctate albe (panourile inferioare). Săgețile indică culoarea pielii zonei tăiate. (C) pigmentarea părului scalpului după epilare la P21. Rețineți hiperpigmentarea la 14 zile după epilare., Săgețile indică culoarea diferită dintre firele de păr fiziologice și firele de păr regenerate induse de epilare. (D) P35 firele de păr ale scalpului și nivelurile de melanină de la șoarecii de control și șoarecii epilați la P21. (E) părul din spate al unui șoarece de 1,5 ani înainte și după epilare. Săgețile indică schimbarea culorii părului înainte și după epilare. (F) firele de păr din spate (panoul superior) și nivelurile de melanină (panoul inferior) din zona epilată și din zona înconjurătoare a unui șoarece de 1,5 ani la 30 de zile după epilare. Săgețile indică culoarea diferită dintre firele de păr fiziologice și firele de păr regenerate induse de epilare., *Indică p < 0.05, **indică p < 0.01.
deoarece firele de păr se regenerează fiziologic pe spatele șoarecilor C57BL / 6J în timpul primului ciclu de păr postnatal (Fig. 1A), ne-am întrebat, de asemenea, dacă epilarea ar induce schimbări în regenerarea părului pe spate. Într-adevăr, la 7 zile după epilare la P21, zona epilată a fost hiperpigmentată în comparație cu cea neepilată (Fig. S2C, D), la fel ca firele individuale regenerate (Fig. S2E)., Aceste date sugerează că hiperpigmentarea indusă de epilare nu este limitată la nivelul scalpului. Având în vedere aceste observații, am întrebat, de asemenea, dacă efectele hiperpigmentării induse de epilare ar funcționa în continuare la șoarecii vechi. Curios, care regenerează firele de păr de la spate de 1,5 ani, soarecii au devenit semnificativ hiperpigmentate 30 de zile după epilare (1.07 ± 0.08 ori, n = 3), în comparație cu unepilated, odihnindu-se fire de par (0.84 ± 0.03) (Fig. 1E,F). În plus, analiza HPLC a arătat că epilarea induce sinteza eumelaninei (1,79 ± 0,09 ori, n = 3) în loc de sinteza feomelaninei (0,97 ± 0.,12 ori, n = 3) în firele de păr din spate (Fig. S3). Acest lucru sugerează că epilarea induce activarea McSCs pentru a genera fie melanocite mai mature, fie crește sinteza melaninei în melanocitele mature în bulbii de păr ai șoarecilor în vârstă.
Epilare-prejudiciu stimuleaza McSC proliferarea și induce generație de dermice și epidermice melanocite și de exprimare a melanogeneza legate de gene
Având în vedere că melanogeneza este cuplat la anagen24, am examinat dacă epilare induse de pigmentare de la nivelul scalpului este cauzată de anagen de inducție. Așa cum se arată în Fig., 2A, foliculii de păr induși de epilare au început imediat anagen, în timp ce la șoarecii de control neepilați, foliculii de păr au rămas la telogen pentru o perioadă mai lungă de timp. Prin urmare, mcscs-ul foliculului de păr liniștit a răspuns la epilare prin activarea acestuia. La șapte zile după epilare, melanocitele pigmentate au fost observate nu numai la bulbii de păr maturi, ci și în dermă, orificiile foliculilor de păr și epiderma interfolliculară (Fig. 2a)., În mod corespunzător, markerii specifici melanocitelor, cum ar fi PMEL17 și TYR, au fost detectați în regiunile pigmentate induse de epilare, dar nu și în foliculii de păr de control (Fig. S4A). În plus, western blot datele au arătat că nivelurile de melanogeneza legate de proteine TYRP1 (4.22 ± 0.96 ori, n = 6) și TYR (9.75 ± 2.76 ori, n = 6) au fost atât crescut semnificativ de epilare (Fig. S4B și S9). Rezultatele sugerează că epilarea nu numai că activează McSCs, ci și induce regenerarea melanocitelor pentru a popula zonele interfolliculare.,
Epilare stimuleaza McSC proliferarea, duce la regenerarea epidermică melanocite și induce expresia de melanogeneza legate de gene. (A) h&e colorarea etapelor distincte ale ciclului părului scalpului la 1, 4 și 7 zile după epilare. Șoarecii C57BL/6 au fost epilați la P21, iar histologia foliculilor de păr a fost analizată în zilele indicate., (B,C) Anti-MITF imunocolorarea (B) și H&E colorare (C) din spate foliculii de par de la soareci de control la P28 și de vârstă potrivit soareci epilated la P21. Săgețile indică celulele MITF+ (B) și granulele de melanină din bulbul de păr (C). Imaginile 3D ale imunostiminării anti-MITF sunt prezentate în Fig. S10. (D) imunostimularea anti-KIT și Ki67 în foliculii de păr din spate ai șoarecilor C57BL/6J la 3 zile după epilare. Rețineți că epilarea induce proliferarea McSCs. Săgețile indică kitul + celulele din umflarea părului., (E) Anti-KIT imunocolorarea de pielea de pe spate de la soareci de control la P24 și de vârstă potrivit soareci epilated la P21 (panouri superioare) și H&E colorare de pielea de pe spate (panouri mai mici) pe zi, 7 după epilare. Notă KIT-celule pozitive în epidermă la 3 zile după epilare și melanocite pigmentate în epidermă la 7 zile după epilare. Săgețile indică kitul + celulă( panouri superioare) și celulă pigmentată (panouri inferioare). (F) graficele arată numărul de Kit+ (panoul din stânga) și celulele pigmentate (panoul din dreapta) în epidermă 3 zile și 7 zile după epilare, respectiv., DP, papilă dermică; Epi, epidermă; Der, dermă; m, melanocite; MG, granule de melanină; SG, glandă sebacee; sHG, germeni secundari de păr. Bar, 50 µm. *Indică p < 0.05, **indică p < 0.01.
În pielea de pe spate, la 7 zile după epilare de la P21, total număr de melanocite în fiecare fir de par bec (20 ± 1.9) a fost semnificativ crescut comparativ cu regenerare fiziologică (de 15,7 ± 1.4) (Fig. 2b)., În mod corespunzător, au existat, de asemenea, mai mulți melanozomi în becurile de păr regenerate induse de epilare decât în becurile de păr regenerate fiziologic (Fig. 2c și Fig. S4C, D). Aceste date sugerează că epilarea a indus hiperproliferarea McSC în timpul primului ciclu de păr postnatal. Într-adevăr, la 3 zile după epilare, McSCs’ ratei de proliferare a fost mai mare (86.2 ± 3,5% din celule au fost Ki67 pozitiv după epilare față de 45,6 ± 3,4% din celule pozitive pentru Ki67 în control) (Fig. 2D)., Interesant este că celulele KIT-pozitive nu au fost găsite în epidermă, dar au existat în umflătura părului la 1 zi după epilare și sunt prezente în mod clar în epidermă la 3 zile după epilare (Fig. 2e și Fig. S5). Numărul de celule Kit+ din epiderma epilată (2,32 ± 0,72 / secțiune, n = 4) este crescut semnificativ în comparație cu epiderma fiziologică (0,77 ± 0,68/secțiune, n = 4) (Fig. 2F). În mod corespunzător, la 7 zile după epilare, celulele pigmentate au fost găsite și în epidermă (Fig. 2E,F)., În plus, RT-PCR cantitative de 7 zile după epilare dezvăluit inducție de multe melanogeneza legate de gene, inclusiv Tyr (2.84 ± 1.13 ori peste control, n = 3), Tyrp1 (3.89 ± 0.72 ori, n = 3), Mitf (3.47 ± 0.38 ori, n = 3), Sox10 (2.13 ± 1.13 ori, n = 3), Pax3 (3.18 ± 0.43 ori, n = 3) și Ednrb (3.28 ± 0.62 ori, n = 3) (Fig. S6A). Luate împreună, aceste rezultate sugerează că epilarea induce proliferarea McSCs, migrarea în epidermă și stimularea programului de melanogeneză.,
Epilare induce EDN3 exprimare în foliculii de par si epiderma
Printre gene induse de epilare, EDNRB fost de un interes special din cauza sale bine cunoscute implicarea în regulamentul de melanocite lineage1, 12. Recent, expresie a acesteia liganzi Edn1 și Edn2 a fost raportat de a fi crescut în timpul fiziologice parului anagen, dar ligand Edn3 exprimare nu a fost affected12. Prin urmare, ne-am întrebat dacă epilarea firelor de păr din spate ar induce acești liganzi., În confirmarea rezultatelor de mai sus, am constatat că în timpul fiziologic de regenerare, expresia Edn1 și Edn2 au crescut în pielea de pe spate la P26, dar Edn3 expresie a arătat nici o schimbare (Fig. 3a și Fig. S11). În mod surprinzător, însă, epilarea nu numai că a indus expresia Edn1 și Edn2, ci și cea a Edn3 (Fig. 3A), al cărui produs codificat, EDN3, s-a dovedit anterior a fi implicat în dezvoltarea melanocitară1, 25, 26. Prin urmare, ne-am concentrat studiul pe EDN3 și calea sa de semnalizare. Am constatat că nivelul proteinei EDN3 a crescut semnificativ în pielea epilată (D0, 0.,94 ± 0,2 ori; D3, 1,81 ± 0,09 ori; D5, 4,57 ± 0,67 ori; n = 6), dar a rămas scăzut în pielea de control (D0, 1,25 ± 0,47 ori; D3, 0,83 ± 0,14 ori; D5, 1,21 ± 0,2 ori; n = 6) (Fig. 3b și Fig. S12). Imunohistochimia a arătat că în ziua de epilare 1, proteina EDN3 a fost crescută în papila dermică, epidermă și germeni secundari de păr. În ziua 7, a fost crescut și în orificiile foliculilor de păr (Fig. 3c). Regiunile cu niveluri ridicate de edn3 induse de epilare au fost în contact strâns cu McSCs în germenul secundar de păr (sHG) sau cu melanocitele bulbului de păr., Folosind adult heterozigot Ednrb lacZ /+ șoareci, am aflat apoi că EDNRB este exprimat în pigmentate melanocite de becuri de păr și în sHG, similar cu expresia de Dct-lacZ în foliculii de par (Fig. 3d). Mai mult, datele de imunostimulare au arătat că celulele β-Gal pozitive au fost co-etichetate cu celule KIT-pozitive în sHG și cu celule MITF-pozitive în bulbul de păr (Fig. 3E), sugerând că EDNRB este exprimată în McSCs și melanocite., As expected, 7 days after epilation, western blot analysis and immunostaining data showed that Ednrb-lacZ expression is significantly increased in melanocytes (Figs S6B,C and S13). These results suggest that epilation induces EDN3, which then stimulates its receptor EDNRB to regulate McSCs and melanocytes.
Epilation induces expression of endothelin-3 (Edn3) in C57BL/6 J mice. (A) RT-PCR and qRT-PCR analysis for Edns expression changes in skin after epilation., Șoarecii au fost epilați la P21 și expresia genelor a fost analizată în zilele indicate. Gelurile cu lungime întreagă sunt prezentate în Fig. S11. (B) analiza Western blotting pentru expresia proteică a EDN3 în piele. Gelurile cu lungime întreagă sunt prezentate în Fig. S12. (C) imunofluorescența EDN3 pe pielea scalpului la 0, 1, 4 și 7 zile după epilare. Săgețile indică celulele EDN3+ din foliculii de păr. (D) colorarea x-gal a foliculilor de păr de la șoarecii transgenici Dct-lacZ (panourile superioare) și șoarecii lacZ/+ Ednrb (panourile inferioare). Săgețile indică celulele lacZ+ din bulgări și bulbi de păr., (E) imunohistochimia β-Gal, KIT și MITF în foliculii de păr pigmentați de la șoarecii Lacz/+ ednrb din ziua 7 postnatală. Săgețile indică celulele co-etichetate kit și β-Gal în bulge (panourile superioare) și celulele mitf și β-Gal co-etichetate în bulbul de păr (panourile inferioare). Epi, epidermă; DP, papilă dermică; sHG, germeni secundari de păr. Bară: 50 µm. **Indică p < 0.01.EDN3 este bine cunoscut pentru efectele sale asupra stimulării creșterii și diferențierii precursorilor melanocitari1, 25, 26., Recent, transgenice supraexprimarea de EDN3 a fost raportată pentru a preveni albirea parului cauzate de repetat epilation27, sugerând că EDN3 afectează, de asemenea, McSCs. Pentru a investiga efectul de EDN3 pe McSCs, am izolat DCT+ celule din E16.5 sușă sălbatică epidermei și i-a stimulat cu EDN3 sau BQ788 (o EDNRB inhibitor). Așa cum se arată în Fig. S7A, stimulare cu EDN3 crește în mod semnificativ rata de proliferare a DCT+ celule (de la 43.7 ± 2% 61,4 ± 7.5%, n = 5), dar acest efect de EDN3 a fost complet blocat de BQ788 (26.4 ± 1.56%, n = 5)., Bazat pe fapte care pentru celule de pigment, DCT este un marker specific al McSCs și că nu există mature melanocite în E16.5 epidermis4, 28, rezultatul sugerează că EDN3/EDNRB este necesar pentru McSC proliferare.pentru a evalua importanța semnalizării EDNRB pentru hiperpigmentarea pielii indusă de epilare, am folosit șoareci homozigoți ednrb lacZ/lacZ (Ednrb -/ -). Astfel de șoareci sunt în mare parte lipsiți de celule pigmentare, dar păstrează pete pigmentate la baza capului și a cozii., Paisprezece zile după epilare în regiunea capului, regenerează firele de păr au fost hiperpigmentate în sușă sălbatică de șoareci (2.41 ± 0.55 ori, n = 5), dar nu în Ednrb−/− mice (Fig. 4A, B). În unepilated Ednrb−/− soareci, melanina niveluri de păr arbori au fost mai mici (0.51 ± 0.06 ori, n = 5), comparativ cu cei de la controlul sușă sălbatică de șoareci (1.02 ± 0.14 ori, n = 5) (Fig. 4b). În plus, repigmentarea pielii a fost semnificativ crescută la șoarecii de tip sălbatic, dar numai ușor la șoarecii Ednrb−/− (Fig. 4c). Nivelurile de melanină ale pielii induse de epilare au fost semnificativ mai mici la șoarecii Ednrb−/− (1,85 ± 0.,79 ori, n = 9) comparativ cu cele de la șoarecii de tip sălbatic (5,1 ± 0,62 ori, n = 9). Aceste rezultate sugerează că ștergerea Ednrb perturbă hiperpigmentarea părului indusă de epilare și repigmentarea pielii. Mai mult, pierderea EDNRB este asociată cu îngroșarea părului. Melanina niveluri de păr pigmentat arbori de Ednrb−/− soareci au fost reduse între o lună de vârstă (0.96 ± 0.1 ori, n = 4) și până la vârsta de 12 luni (0.37 ± 0.12 ori, n = 4), în contrast cu nivelul lor în păr arbori de sușă sălbatică de șoareci (1.96 ± 0.17 ori, n = 4, la o lună; 2.15 ± 0.43 ori, n = 4, la 12 luni) (Fig. S7B).,
Genetice și farmacologice perturbare a Ednrb blocuri de epilare induse de păr și hiperpigmentarea pielii. (A) pigmentarea părului șoarecilor Ednrb−/− înainte și după epilare la P21. Săgețile indică firele epilate (panourile din dreapta) și cele neepilate (panourile din stânga) pigmentate ale scalpului Ednrb−/−. (B) Secțiunea histologică a firelor de păr (panourile superioare) și conținutul de melanină (panoul inferior) al arborilor de păr ai șoarecilor wildtype și Ednrb−/− înainte și după epilare., Săgețile indică scăderea melaninei în arborele de păr al șoarecilor Ednrb -/ -. (C) pigmentarea scalpului P28 al șoarecilor wildtype și Ednrb−/− după epilare la P21. Săgețile indică zona epilată a wildtype (panouri superioare) și șoareci Ednrb−/− (panouri inferioare). (D, E) pielea de pe Spate de P26 soareci epilated la P21 și intracutaneously injectat cu soluție salină fiziologică (panouri superioare) sau BQ788 (panouri mai mici), în zilele indicate de săgețile verticale (D). Săgețile albe indică culoarea pielii zonelor epilate și tăiate. (E) graficul arată nivelurile relative de melanină ale pielii din spate., Rețineți că în ziua 5 după epilare de-a lungul liniei punctate roșii, tăierea de-a lungul liniei punctate albe arată firele de păr din jur ca controale pentru regenerarea fiziologică a pigmentării foliculare a părului. id, injecție intradermică. *indică p < 0.05; **indică p < 0.01.pentru a examina dacă semnalizarea EDNRB este necesară pentru hiperpigmentarea indusă de epilare în pielea din spate, am efectuat injecția intradermică de BQ788, după epilarea șoarecilor wildtype. Așa cum se arată în Fig., 4D, în timp ce injectarea intradermică de control a NaCl după epilare a permis hiperpigmentarea pielii (de la 0,23 ± 0,06 ori până la 1,0 ± 0,15 ori, n = 3), injectarea BQ788 a scăzut semnificativ pigmentarea pielii indusă de epilare (0,76 ± 0,1 ori, n = 3). Această constatare sugerează că întreruperea farmacologică a EDNRB poate bloca hiperpigmentarea pielii indusă de epilare în pielea din spate. Luate împreună, aceste date sugerează că semnalizarea EDNRB este necesară pentru hiperpigmentarea indusă de epilare.,pentru a examina modul în care lipsa Ednrb scade pigmentarea pielii, am analizat histologic pigmentarea foliculilor de păr de pe scalp (care, așa cum am menționat, rămâne pigmentat la șoarecii Ednrb-/− în contrast cu spatele). Așa cum se arată în Fig., 5A, a 5 a zi dupa epilare, becuri de păr și păr arbori de Ednrb−/− soareci au fost prezente în mod normal în scalp, dar au fost hipopigmentate, comparativ cu cei de sușă sălbatică șoareci, ceea ce sugerează că pierderea de EDNRB nu afectează ciclul de păr, dar scade melanocite numere sau sinteza de melanină în bulb. Într− adevăr, la 7 zile după epilare, numărul melanozomului de șoareci Ednrb−/ – a fost mult mai mic decât cel al șoarecilor wildtype (Fig. 5b)., În plus, melanocite-markeri specifici, cum ar fi PMEL17 și TYR-ar putea să nu fie detectate în derm, orificiile foliculilor de par, sau interfollicular epiderma Ednrb−/− soareci 5 zile după epilare, chiar dacă acestea au fost prezente la niveluri scăzute în becuri de păr (Fig. S7C). Mai mult, setul de markeri McSC și melanocitele pigmentate au rămas nedetectabile chiar și la 7 zile după epilare (Fig. 5c și Fig. S7D). Aceste rezultate au sugerat că EDNRB este necesară pentru regenerarea melanocitelor epidermice induse de epilare.,
Pierdere de EDNRB blocuri McSC migrației în epidermei, reduce melanocite proliferarea în păr bec și scade expresia unor melanogeneza legate de gene. (A) histologia foliculilor de păr ai scalpului de la șoarecii wildtype și Ednrb−/− la 5 zile după epilare. Săgețile indică granule de melanină în becul de păr și becul de păr pigmentat. (B) melanozomi de wildtype și Ednrb−/− șoareci în becuri de păr 7 zile post-epilare relevat prin microscopie electronică de transmisie (TEM)., Săgețile indică melanozomul. (C) imunostimularea Anti-KIT a scalpului de la șoarecii wildtype și Ednrb−/− la 3 zile după epilare. Rețineți lipsa celulelor KIT-pozitive în epiderma Ednrb – / – la 3 zile după epilare. (D) Anti-KIT și Ki67 imunocolorarea a foliculilor de par de la sușă sălbatică și Ednrb−/− soareci 3 zile post-epilare (panouri superioare) și cantitative graficul de melanocite proliferarea în păr bec (panou inferior). (E) imagini ale culturilor primare de melanocite de la șoareci wildtype și Ednrb−/− și (F) pelete celulare corespunzătoare (panoul superior) și conținut de melanină (panoul inferior)., Săgețile indică peleta celulară. (G) analiza qRT-PCR pentru exprimarea genelor legate de melanogeneză în pielea scalpului de la șoarecii wildtype și Ednrb-/− la 7 zile după epilare. Epi, epidermă; HS, ax de păr. Bar, 50 µm. *Indică p < 0.05; **indică p < 0.01.
Pentru a analiza modul în care pierderea de EDNRB scade nivelul de melanina din par de becuri, apoi am cuantificat melanocite numere în fiecare fir de par bec de sușă sălbatică și Ednrb−/− soareci 7 zile după epilare., Numărul de MITF-celule pozitive la epilare a fost mai mică în fiecare folicul de păr de Ednrb−/− mice (11.7 ± 2.2), comparativ cu foliculii de par din sușă sălbatică de șoareci (cu 15,7 ± 1.43) (Fig. S7D). Acest rezultat a sugerat că pierderea EDNRB ar putea bloca proliferarea indusă de epilare a celulelor melanocitare. Recent, Takeo și colab. a constatat că în timpul fiziologic de regenerare a parului, EDNRB de semnalizare este, de asemenea, necesare pentru McSCs proliferarea și maintenance29. Cu toate acestea, dacă EDNRB afectează proliferarea McSC indusă de epilare nu a fost încă cunoscută., Deoarece EDN3 este exprimat în papila dermica în apropierea mature melanocitelor din bulbul de par, am testat dacă EDN3/EDNRB semnalizare afectează McSC proliferarea în umflatura sau stimulează sinteza de melanină în folicular melanocite. La nivelul scalpului, anti-KIT și Ki67 imunocolorarea datele au aratat ca 3 zile după epilare, McSC proliferarea în fiecare fir de par umflatura de Ednrb−/− mice (52 ± 5.2%) a fost mai mic decât în corespunzătoare colectari de sușă sălbatică de șoareci (86.2 ± 3.5%) (Fig. 5D). Acest lucru sugerează că EDNRB este, de asemenea, necesar pentru proliferarea McSC indusă de epilare în umflarea părului.,pentru a obține informații suplimentare despre mecanismele de bază, am izolat melanocitele pentru cultivarea in vitro. Așa cum se arată în Fig. 5E, pigmentarea Ednrb−/− primar de melanocite din pigmentate cap foliculii de par de P6 Ednrb−/− soareci a fost mai mică (0.47 ± 0.1 ori, n = 5) decât cea a sușă sălbatică primar melanocite (1.0 ± 0.1 ori, n = 5). Rezultate similare au fost obținute în peletele celulare sau când conținutul de melanină a fost măsurat direct (Fig. 5F). Am analizat apoi dacă semnalizarea EDNRB ar afecta expresia genelor legate de melanogeneză. Așa cum se arată în Fig., 5G, la 7 zile după epilare, expresia de melanogeneza legate de gene a fost scăzut în Ednrb−/− scalp, inclusiv expresia de Pax3 (0.47 ± 0.07 ori, n = 3), Tyr (0.55 ± 0.05 ori, n = 3) și Tyrp1 (0.5 ± 0.02 ori, n = 3). Acest lucru sugerează că EDN3/EDNRB de semnalizare este implicat atât în melanocite proliferarea și melanogeneza în timpul epilării induse de regenerare răspunsurile McSCs. Luate împreună, aceste rezultate indică faptul că epilare induce melanogeneza legate de expresia genelor prin EDN3/EDNRB de semnalizare și, la rândul său, duce la hiperpigmentarea pielii și a părului.
Lasă un răspuns