Abstract
bicinchoninic acid (BCA) testului, descris pentru prima dată de Smith et al. (1) este similar cu testul Lowry, deoarece depinde și de conversia Cu2+ în Cu+ în condiții alcaline (a se vedea capitolul 2). Cu+ este apoi detectat prin reacția cu BCA. Cele două teste au o sensibilitate similară, dar deoarece BCA este stabilă în condiții alcaline, acest test are avantajul că poate fi efectuat ca un proces cu o singură etapă în comparație cu cele două etape necesare în testul Lowry., Reacția are ca rezultat dezvoltarea unei culori purpurii intense cu o absorbție maximă la 562 nm. Deoarece producția de Cu+ în acest test este o funcție a concentrației proteinei și a timpului de incubație, conținutul de proteine al probelor necunoscute poate fi determinat spectrofotometric prin comparație cu standardele proteice cunoscute. Un alt avantaj al testului BCA este că, în general, este mai tolerant la prezența compușilor care interferează cu testul Lowry., În special, nu este afectată de o serie de detergenți și agenți de denaturare, cum ar fi ureea și clorura de guanidiniu, deși este mai sensibilă la prezența zaharurilor reducătoare. Sunt descrise atât un test standard (0,1–1,0 mg proteină/mL), cât și un microtest (0,5-10 µg proteină/mL).
Lasă un răspuns