Abstrakt
bicinkoninsyraanalysen (BCA), som först beskrevs av Smith et al. (1) liknar Lowry-analysen, eftersom den också beror på omvandlingen av Cu2+ till Cu+ under alkaliska förhållanden (se kapitel 2). Cu+ detekteras sedan genom reaktion med BCA. De två analyserna är av liknande känslighet, men eftersom BCA är stabil under alkaliförhållanden har denna analys fördelen att den kan utföras som en enstegsprocess jämfört med de två steg som behövs i Lowry-analysen., Reaktionen resulterar i utvecklingen av en intensiv lila färg med ett absorbansmaximum vid 562 nm. Eftersom produktionen av Cu + i denna analys är en funktion av proteinkoncentration och inkubationstid, kan proteininnehållet i okända prover bestämmas spektrofotometriskt i jämförelse med kända proteinstandarder. En ytterligare fördel med BCA-analysen är att den i allmänhet är mer tolerant mot närvaron av föreningar som stör Lowry-analysen., I synnerhet påverkas det inte av en rad tvättmedel och denatureringsmedel som urea och guanidiniumklorid, även om det är känsligare för närvaron av reducerande sockerarter. Både en standardanalys (0, 1–1, 0 mg protein/mL) och en mikroanalys (0, 5–10 µg protein/mL) beskrivs.
Lämna ett svar